常规表达标准

大肠杆菌原核表达步骤及交付标准
1、表达体系系统选择(客户提供表达菌株的略过此步骤,仅提供表达质粒的可选择宿主菌)
1.1、可选表达载体
低温诱导启动子载体:pCzn1-His,pSumo-Mut;
常规商业化载体:pET26,pET28,pET32等系列;pGEX-4T,
pGEX-6T等系列;pMAL等系列
1.2、可选表达菌株
Arcti Express低温诱导菌株系列
Origami高表达菌株系列
Rosetta-GAMI稀有密码子兼容性菌株系列
2.1 表达质粒构建 周期 交付数据及材料 报价
·基因优化
·亚克隆设计
·合成基因
·亚克隆至载体

载体构建
2-3周

1、基因合成报告
2、测序验证报告
3、包含表达质粒的大肠杆菌DH5a
4、表达质粒
5、质粒说明书

大肠杆菌原核蛋白表达服务属于科研型服务项目,为了给您提供更专业、细致的服务支持

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2.2 蛋白表达小试分析鉴定    
·转化
·表达小试
·表达分析鉴定
·扩大培养
表达鉴定
1周
6、阳性表达菌株
7、小试表达流程报告
8、小试表达分析原始图片
9、小试表达总结
2.3 蛋白表达纯化    
·蛋白亲和纯化(上清)
·包涵体蛋白变复性
·WB鉴定纯化后蛋白
·PFM检测(可选)
·MS检测(可选)
表达纯化
1-2周
10、蛋白纯化流程报告
11、蛋白纯化原始图片
12、发货蛋白
13、Western Blot(标签抗体)
14、蛋白指纹图谱(可选)
15、蛋白质谱分子量(可选)
2.4 发酵罐放大培养    
·放大培养(10-20L)
·放大培养(50L以上)
发酵培养
3-4周
16、蛋白纯度鉴定报告
17、成品蛋白(依据表达小试结果约定价格)