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公司新闻

1、热烈祝贺钟山生命科学园更名,园区环境大幅改善。

2、2015年12月,钟鼎生物正式获批“企业研究生工作站”,“江苏省高科技企业”等一系列称号。

3、2015年8月,钟鼎生物正式获批“国家级高新科技企业”殊荣。more

荧光定量PCR技术服务技术支持

荧光定量PCR 实时荧光定量PCR技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法,目前在基因表达研究和临床疾病检测等领域已得到广泛应用,南京钟鼎生物技术公司使用SYBRgreen法或者 Taqman 法对 DNA/RNA 进行 real time PCR 的定量测定或型的鉴定。

SYBR Green荧光染料法:适用于任何DNA,无需设计探针,采取双标准曲线法,实验周期短,结果重复性好,灵敏度高。
TaqMan荧光探针法:经验丰富的实验技术人员设计探针,对目标基因有高特异性,实验重复性好,相对于SYBR Green法,灵敏度更高。

钟鼎生物荧光定量PCR技术服务的优势:
1、我们使用罗氏的Lightcycler的荧光定量PCR仪器,高灵敏度、高重复性、高分辨率、动力学范围广,仪器稳定性有保障,数据能够比较真实的反映出样品中RNA的相对含量变化。
2、荧光定量PCR检测实验中所用的试剂耗材搭配是经过我们多年的实验经验筛选优化,大多为进口的试剂耗材,首选质量,其次是成本。
3、我们检测的样本包含多个物种(人、小鼠、大鼠、昆虫、线虫、水稻、棉花、葡萄、桃花等),针对不同的物种材料,我们有不同的内参设计方案,并非一律使用GAPDH或β-actin,科学的内参设计方案更加有利于提高荧光定量PCR数据可靠性。
4、多年的荧光定量PCR实验经验,2014年检测量超过10万反应,批量化的流水线作业减少个体实验的误操作差异概率。

荧光定量PCR服务报价 

荧光定量PCR技术服务
服务项目 样品数量 服务报价(促销价) 服务说明

RNA提取反转录

RNA专区操作,进口试剂,规范操作,确保反应模板品质

10个样品以下 150元/样品 100元/样品 样品量>100mg
10-20个样品 130元/样品 90元/样品 样品量>100mg
20-30个样品 110元/样品 80元/样品 样品量>100mg
30个样品以上 询价 样品量>100mg

基因检测

Light Cycler定量PCR仪器,圆形反应热室,无边缘效应,灵敏度更高,三孔重复

1个基因/样品 160元/基因 110元/基因 1-2周
2个基因/样品 140元/基因 100元/基因 1-2周
3个基因/样品 120元/样品 90元/基因 1-2周
超过3个基因/样品 询价 1-2周

1、需要进行绝度定量的实验,需提供或委托钟鼎生物构建标准品质粒,以标准质粒构建标准曲线(选5个浓度梯度,3次重复)。
2、使用SYBR-Green染料法进行实验时,引物费用60元/对,每个样品会依据样品来源配套特异性内参,三个复孔重复。
3、使用荧光探针法时,标记探针费用1200元/条,内参引物探针免费。 样品数量较大时,请联系技术支持人员或销售人员,享受更大的折扣优惠!


荧光定量PCR绝对定量PCR-标准曲线绘制:
绝对定量是用已知浓度的标准品绘制标准曲线来推算未知样品的量。一般我们将待测的基因序列装入已知大小的质粒中作为标准品,将标准品稀释至梯度浓度,作为底物模板进行荧光定量PCR反应。以标准品拷贝数的对数值为横坐标,以测得的CT值为纵坐标,绘制标准曲线。当检测未知样品时,使用与标准质粒相同的反应条件和相同的引物序列,扩增得出CT值,即可在标准曲线中计算出样品中目的基因拷贝数。

荧光定量PCR标准曲线绘制
服务项目 实验说明 实验周期 实验报价
标准质粒构建 基因合成或PCR克隆法构建 1周 500元
标准曲线绘制 选择六个浓度梯度绘制标曲 1-2工作日 600元

荧光定量PCR标准曲线

荧光定量PCR服务流程
1、根据基因序列设计特异性的引物或荧光探针
2、提取样品 DNA/ RNA、电泳、反转录
3、RealTime PCR(荧光定量PCR),进行扩增曲线、溶解曲线、表达量差异分析等实验
4、实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料

荧光定量PCR样品要求
为了更好的为您服务,请提供尽量多的、新鲜的、保存完好的实验组织材料或模板材料,将待检测的目的基因序列或Genebank ID发送至order@zoonbio.com,尽可能提供DNA/RNA来源、丰度等。

样品类型 细胞 组织 全血 血浆 RNA DNA
样品最少量 106 100mg 500ul 500ul 5ug 5ug
推荐保护剂 Trizol Trizol 肝素 柠檬酸 Rnase-Free水
运输条件 液氮/干冰 干冰 干冰 干冰 干冰 冰袋

荧光定量PCR实验实例:

1、RNA提取实验,钟鼎生物特色提取试剂盒,专区操作,提取的RNA质量更胜一筹。 RNA的质量在荧光定量PCR检测实验中非常重要,虽然荧光定量PCR的产物较小,即使在RNA不完整或有降解的状态下,其反转录的产物的扩增曲线依然可用,但为了让数据更加接近真实,我们仍然希望提供最新鲜的材料,使用最严谨的RNA提取方法获得高品质的RNA。

荧光定量PCR-RNA提取实验

2、荧光定量PCR反应,钟鼎生物采用的罗氏经典的lightCycler荧光定量PCR仪器,无边缘效应,能最大程度上反应样品中的相对含量,下图为使用仪器自带软件导出的扩增曲线和溶解曲线图,通过图形即可初步判断扩增效率及扩增产物的特异性,我们会为每一个样品拟合扩增曲线及溶解曲线,提供最原始的分析数据。

荧光定量PCR扩增曲线溶解曲线

3、荧光定量PCR实验数据分析,每样品分三复孔平行检测,交付报告中直接分析原始数据,计算相对表达量,并以客户指定的样品为标准进行相对定量数据分析。由于样品的特异性,RNA的完整性,引物扩增的效率等因素,荧光定量数据并非100%精确的反映基因的绝对含量,其相对数据只能为基因表达量的判断提供参考。此外,钟鼎生物严格按照荧光定量PCR实验操作流程进行实验,其数据为实验数据的真实反应,我们不承诺分析得到的荧光定量相对定量数据与客户的理论预期100%一致。

荧光定量PCR实验数据分析

荧光定量PCR相对定量数据分析

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荧光定量PCR技术服务合同 荧光定量PCR技术服务合同